從目前疫情匯總情況看，武漢仍有大量的疑似新型冠狀病毒肺炎確診艱難。根據1月23日武漢市衛(wèi)生健康委員會針對新型冠狀病毒肺炎防控情況的介紹，此前，疑似病例樣本“由轄區(qū)疾控中心轉運到武漢市疾控中心，武漢市疾控中心轉運到湖北省疾控中心進行核酸檢測，每天可檢測樣本200多份”。
每天檢測200多份樣品，顯然無法滿足不斷涌入醫(yī)院的發(fā)熱病人確診需求。由于核酸檢測是新型冠狀病毒肺炎確診的最關鍵步驟，因此核酸檢測的效率似乎成為新型肺炎確診效率的瓶頸。
那么，武漢新型冠狀病毒肺炎核酸檢測為什么這么難？
太長不看：
新型冠狀病毒核酸檢測需使用的熒光PCR法耗時較長，對實驗室、設備、人員均有要求。
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指定檢測機構和資源分配是目前的瓶頸。
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確診難的情況有望隨試劑盒快速審批得到緩解。
目前采用的新型冠狀病毒核酸檢測方法叫做熒光PCR法，這是一項有著幾十年歷史的成熟的分子生物學技術。PCR全稱為Polymerase Chain Reaction，中文翻譯為“聚合酶鏈式反應”。早在1983年，美國Cetus公司的穆利斯（ Kary Mullis）首先提出設想，并在1985年發(fā)展出現在的PCR技術。1993年，穆利斯因發(fā)明PCR技術獲得諾貝爾化學獎。
熒光PCR技術出現于1996年，在原有技術的基礎上，通過熒光染料或熒光探針來指示DNA復制的拷貝數，通過相應的軟件分析熒光信號，計算樣品中初始核酸分子的含量。熒光PCR技術相比原來常規(guī)PCR，可以更加精確地定量測定生物樣本中的核酸含量，目前成為病毒核酸檢測的常規(guī)方法之一。
新冠狀病毒核酸檢測試劑盒就是通過熒光PCR技術，檢測病人肺泡灌洗液、咽拭子、血液等樣本中新冠狀病毒核酸的含量，如果核酸含量超過某個臨界值（即陽性結果），則認為該病人被新冠狀病毒感染；如果樣本中核酸含量低于某個臨界值（即陰性結果），則認為該病人沒有被該病毒感染。
要對新冠狀病毒進行核酸檢測，首先要獲得新冠狀病毒的遺傳物質RNA全基因組序列信息。
在獲得患者標本12天后，上海市公共衛(wèi)生臨床中心于2020年1月7日在實驗室檢出一種新型冠狀病毒，并獲得了其全基因組序列。
之后，便可以設計并人工合成PCR所需要的“引物”（一小段DNA分子，用于啟動DNA復制）和熒光探針，對病人的生物樣本進行核酸測試。經過在實驗室中對熒光PCR實驗條件的優(yōu)化、測試和驗證，確保試劑盒的準確性和精確性，避免出現誤診（假陽性）和漏診（假陰性），便可獲得用于臨床診斷的標準化新冠狀病毒核酸檢測試劑盒。
據報道，三家已經通過國家疾控中心認證的試劑盒生產企業(yè)（輝睿生物、捷諾生物和伯杰醫(yī)療）迅速投入生產，僅捷諾生物一家就在1月16日生產了可供7.5萬人份使用的試劑盒。
從分離病原體、鑒定新冠狀病毒、獲得全基因組序列、研發(fā)核酸檢測（熒光PCR）試劑盒，到試劑盒的投入生產，只用了不到一個月，這個反應速度是非?？斓摹?/span>
不過，相對于一些常規(guī)臨床檢測（比如血常規(guī)只有半個小時），熒光PCR測試花費的時間要長得多。
在進行熒光PCR測試之前，先要從病人的生物樣本（肺泡灌洗液、咽拭子、血液等）中提取病毒核酸。一般核酸提取儀所需時間從半小時到2小時不等，一次可提取的樣本通量從32個到96個不等。熒光PCR測試需在熒光PCR儀器上進行，通常需要2個小時左右。
一臺熒光PCR儀器通常一次可以測試96個樣本，由于測試時需要做陽性對照和陰性對照用于檢測的質量控制，因此一般一臺熒光PCR儀器一次最多可以檢測88個樣本。加上試劑的準備、上樣等操作時間，一輪熒光PCR測試差不多需要5個小時，之后結果分析和出檢測報告還需要時間。因此從病人樣本送到實驗室即刻開始測試到出檢測報告差不多也需要8個小時。
一臺PCR儀24小時不停歇輪3班，每班配一個檢測實驗員，每班最多88個樣本，24小時只能檢測200多個樣本。這其中還可能出現首次檢測結果模棱兩可（介于陽性和陰性之間的結果）需要復檢的樣本。
由于新冠狀病毒屬于傳染性較強的病毒，為了防止測試過程中發(fā)生病毒泄露或人員感染等生物安全事件，這類病毒的核酸檢測實驗室還必須達到至少二級生物安全實驗室級別，同時采用生物安全三級實驗室的個人防護，操作人員也必須是經過專業(yè)訓練的檢測員。
因此符合條件的實驗室數量、熒光PCR儀器數量、操作人員的數量成為決定新冠狀病毒核酸檢測效率的重要因素。
